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高尔基染色(含多层染色)

货号:GP1056

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一、实验器材及试剂

1、 实验器材

名称

厂家

型号

脱水机

武汉俊杰电子有限公司

JJ-12J

包埋机

武汉俊杰电子有限公司

JB-P5

病理切片机

上海徕卡仪器有限公司

RM2016

冻台

武汉俊杰电子有限公司

JB-L5

组织摊片机

浙江省金华市科迪仪器设备有限公司

KD-P

烤箱

天津市莱玻瑞仪器设备有限公司

GFL-230

载玻片

Servicebio

 

正置光学显微镜

日本尼康

Nikon Eclipse E100

成像系统

日本尼康

Nikon DS-U3

2、 主要实验试剂

试剂名称

厂家

货号

蔗糖

国药集团化学试剂有限公司

57-50-1

无水乙醇

国药集团化学试剂有限公司

100092683

二甲苯

国药集团化学试剂有限公司

10023418

高尔基染液套装

Servicebio

 

中性树胶

国药集团化学试剂有限公司

10004160

二、实验步骤

1取材固定将老鼠杀死后,立刻取脑组织置于4%的多聚甲醛液中固定24h以上。

2、高尔基染色:用生理盐水将脑组织轻轻漂洗几遍,将需要的实验部位切成2-3mm厚的脑组织块,高尔基染液将脑组织块完全浸没,放置阴凉通风处避光处理14天,浸泡48h后,换一次新染液,之后每隔3天换一次新染液。

3、组织块脱水:将组织块取出,置于15%的蔗糖溶液中4℃且避光条件下脱水约1天,取出组织块,置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光条件下脱水2天。

4、显影:将组织块取出,蒸馏水洗1min,浓氨水处理45min,蒸馏水洗1min,定影液处理45min,蒸馏水洗1min

5、脱水冰切封片:置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光条件下脱水2-3天,冰冻切片100um,甘油明胶封片,拍照保存结果。

6显微镜镜检,图像采集分析

三、结果判读

 神经元呈黑色,胶质细胞呈黑色,背景灰色或者棕黄色。

四、注意事项:

1、染液配制的量需要根据实际情况来定,配制过多易造成浪费。

2、染液一定要避光保存,并且实验过程中的每一步操作都要求避光。

3、染色完成后,若客户需要返还组织块,将剩余组织块放在30%的蔗糖中4℃避光运输。

 

 

 

 

 

 

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