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ALP碱性磷酸酶染色

货号:GP1053

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项目介绍:

       碱性磷酸酶染色,又称Alp染色,是用于检测骨细胞、骨组织、肾、肝碱性磷酸酶的染色方法,使碱性磷酸酶呈黑色,细胞核呈浅蓝色,这是成熟成骨细胞的标志性酶;也可用于肝炎和肾炎的检测。



实验流程: 


(1) 样本接收:石蜡切片、细胞爬片、冰冻切片

(2) 实验步骤:脱蜡至水染液配制-Alp染色-苏木素浅染核

(3) 实验结果:染色好的玻片



注意事项:


1、注意染液要现配现用。

2、注意切片要用超纯水水洗。

碱性磷酸酶(ALP)染色实验报告

一、实验器材及试剂

1、实验器材



名称

厂家

型号

脱水机

武汉俊杰电子有限公司

JJ-12J

包埋机

武汉俊杰电子有限公司

JB-P5

病理切片机

上海徕卡仪器有限公司

RM2016

冻台

武汉俊杰电子有限公司

JB-L5

组织摊片机

浙江省金华市科迪仪器设备有限公司

KD-P

烤箱

天津市莱玻瑞仪器设备有限公司

GFL-230

载玻片

Servicebio


正置光学显微镜

日本尼康

Nikon Eclipse E100

成像系统

日本尼康

Nikon DS-U3



2、主要实验试剂



试剂名称

厂家

货号

无水乙醇

国药集团化学试剂有限公司

100092683

二甲苯

国药集团化学试剂有限公司

10023418

ALP染液套装

Servicebio


苏木素染液

servicebio

G1004

分化液

servicebio

G1005-3

返蓝液

servicebio

G1005-4

中性树胶

国药集团化学试剂有限公司

10004160




二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,水洗,蒸馏水洗三遍。

2、工作液配制:β-甘油磷酸钠2.5ml,巴比妥钠2.5ml,氯化钙4.5ml,硫酸镁0.2ml,蒸馏水0.3ml依次混合。

3、孵育染色:将工作液滴于组织切片上,切片放入湿盒中于37℃孵育4h,蒸馏水洗2遍,硝酸钴水溶液处理5min,蒸馏水洗3-5遍,硫化铵水溶液处理30s-1min,流水冲洗5min。

4、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。

5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

6、显微镜镜检,图像采集分析。


三、结果判读:

        成骨细胞胞浆呈棕黑色,细胞核呈浅蓝色。


四、注意事项:

1、工作液每配制一步都要混匀,现配现用;

2、染液应保存在4℃,使用前先复常温。


1病理样本-修改.jpg

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