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流式细胞术

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流式表抗-三标

货号:GC1030

品牌:Servicebio

价格:¥105

规格:

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一、项目介绍

  流式表抗:使用抗原-抗体反应的原理,运用流式细胞仪,检测细胞表面抗原或者胞内抗原的实验方法。另外,对于同一样品检测不同种抗原,可以分为单标、双标、三标。

  按照抗体是否直接标记荧光,可以分为直接标记法和间接标记法。

二、实验流程

1、收集细胞:弃去上清,加入1 mL PBS清洗一次,弃上清,再加入1 mL 0.25%胰酶消化细胞,待细胞变圆且有部分细胞悬浮,即加入PBS终止消化。用移液枪轻轻吹打细胞,使细胞悬浮。细胞悬液转入离心管中,1500 rpm离心5 min收集细胞。

2、PBS洗涤细胞:加入3 mL 4℃预冷的PBS完全重悬细胞,1500 rpm离心5 min,弃上清。沉淀震荡混匀。

3、抗体标记

  ①直接标记法标记:加入100 µL 直标抗体稀释液(PBS配制),避光染色30 min。

  ②间接标记法标记:

加一抗:加入100 µL一抗抗体稀释液(PBS配制),室温孵育60 min。

加二抗:孵育完后用预冷的PBS洗涤1次,1500 rpm离心5 min,弃上清。加入100 µL二抗抗体稀释液(PBS配制),避光室温孵育30 min。

4、PBS洗涤细胞:加入500 uL 4℃预冷的PBS完全重悬细胞,1500 rpm离心5 min,弃上清。沉淀震荡混匀,用200 μL 的4℃预冷的PBS重悬细胞。
 

三、客户提供信息

  1、提供抗体货号及厂家

  2、细胞信息

  3、实验要求
 

四、样本寄送须知

  细胞常温,血样4℃运输。
 

五、结果展示
 

  

流式表抗-单标结果

流式表抗-双标结果

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