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尼罗红染色(含荧光拍照)

货号:GDP1017

品牌:Servicebio

价格:¥45

规格:

简介: 尼罗红是一种亲脂性的荧光染料,通过与脂类物质(腊酯、三酰甘油以及各种脂肪酸)结合后发出荧光检测信号,快速、敏感、可靠地检测出细胞内的脂类成分,在荧光显微镜(或共聚焦显微镜)下呈现桔红色或者红色。因此 经常被用于检测动物以及微生物细胞内的油脂情况。也可以检测植物种子内的油脂情况。

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  一、项目介绍

  尼罗红是一种亲脂性的荧光染料,通过与脂类物质(腊酯、三酰甘油以及各种脂肪酸)结合后发出荧光检测信号,快速、敏感、可靠地检测出细胞内的脂类成分,在荧光显微镜(或共聚焦显微镜)下呈现桔红色或者红色。因此 经常被用于检测动物以及微生物细胞内的油脂情况。也可以检测植物种子内的油脂情况。

  二、染色步骤:

  动物组织:纯脂肪或者动脉周边脂肪或者血管

  1、组织经脂肪固定液固定24h以上,进行冰冻切片,切片自然晾干。

  2、配制尼罗红染色液,混匀。

  3、避光染色10min。

  4、倾去切片上的染色液,PBS浸洗,蒸馏水2缸浸洗。

  5、切片稍甩干,滴加DAPI染液,避光染色8min,倾去切片上的染色液,蒸馏水3缸浸洗。

  6、抗荧光淬灭封片剂封片,避光,4℃暂存。

  7、荧光显微镜或者共聚焦显微镜采集图像。

  植物种子:花生

  1、将植物种子切成1x3mm的小块,将小块置于2.5%的戊二醛中固定48h以上,之后用滤纸包好置于包埋框中流水冲洗一夜。

  2、取出种子小块置于EP管中,加入适量的1%的锇酸浸泡20min-3h,0.1M的PB浸洗1次,5%的戊二醛常温固定1h,抽真空约3-5min。

  3、将种子小块置于新的EP管中,用0.1M的PB缓冲液浸泡过夜。

  4、用蒸馏水浸洗2-3遍,依次入50%、70%、80%、90%、100%Ⅰ、100%Ⅱ、二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中脱水透明,各15min;

  5、浸蜡3h以上,石蜡包埋,常规切片烤片。

  6、切片脱蜡至水,配制尼罗红染色液,混匀。

  7、避光染色10min。

  8、倾去切片上的染色液,PBS浸洗,蒸馏水分2缸浸洗。

  9、切片稍甩干,滴加荧光增白剂,避光染色5-10min,倾去切片上的染液,蒸馏水3缸浸洗。

  10、抗荧光淬灭封片剂封片,避光,4℃暂存。

  11、荧光显微镜或者共聚焦显微镜采集图像。