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细胞检测

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Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)

货号:G4103-5

价格:¥350

规格: 5ml

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  产品简介:

  Cell Counting Kit-8,简称CCK-8(或CCK8)试剂盒,是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。

  其检测原理在于,试剂盒中含有类似于MTT的WST-8化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可以被细胞内脱氢酶还原成水溶性的橙黄色甲瓒化合物。甲瓒量与活细胞数量成正比,即细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

  本试剂盒可以用于外源细胞因子等诱导的细胞增殖检测,以及药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒 性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。

  本试剂盒使用便捷,不需要配制或稀释,无须收集细胞,无须洗涤细胞,也不需要对甲瓒化合物进行再次溶解,对于批量样本的检测非常方便。

  酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

  WST-8对细胞无明显毒性。加入CCK-8溶液显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到最佳测定时间。

  本试剂盒可以测定100/500个样品。

  包装内容:

产品货号 产品名称 规格
G4103 Cell Counting Kit-8 1 mL /5 mL

  保存条件:

  4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存两年有效。

  使用方法:

  1.细胞种板:每孔加入100 μL细胞悬液(约1000-5000个细胞),如果是进行细胞增殖实验,每孔细胞数量不超过3000个;如果进行细胞毒性实验,每孔细胞数量约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素进行预实验确定。按照实验需要,进行培养并给予给药处理,药物体积不超过细胞悬液体积的1/10。

  2.加入CCK-8:待细胞处理结束后,每孔加入10 μL CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200 μL,则需加入20 μL CCK-8溶液,其它情况以此类推。以空白细胞培养加入CCK-8溶液的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测,以加了空白细胞培养液、等量药物和CCK-8溶液的孔作为溶剂对照,扣除药物对结果的影响。

  3.孵育显色:加好CCK-8的96孔板在细胞培养箱内继续孵育0.5-4小时。

  4.测定结果:96孔板在酶标仪中于450 nm处测定吸光度。

  注意事项:

  1.本试剂盒检测原理是依赖于脱氢酶催化的反应,所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测,如果待检测体系中存在较多的还原剂,需设法去除。

  2.确保孔内液体中没有气泡,否则会干扰检测结果。

  3.由于本测试一般在96孔板中进行,如果培养时间较长,要注意液体蒸发问题。96孔板外侧一圈孔内液体最易蒸发,可以采取向外围一圈孔内加入等体积PBS、水或培养液。在培养箱中放置96孔板时,尽量靠近水源地方,以减缓液体蒸发。

  4.本产品仅限于科学研究用。

  5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。