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核酸电泳

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低熔点琼脂糖

品牌:国产

价格:¥280

规格: 5g

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  正确的加热方式对琼脂糖的充分溶解和凝结至关重要,在此,我们提供以下几点作为正确制备琼脂糖凝胶的操作参考。

  1.琼脂糖加热溶解所需时间短。

  2.琼脂糖在TAE或者TBE缓冲液中不溶解,加热时,琼脂糖颗粒水化形成溶液,水化是时间依赖的,不同的琼脂糖水化点不同。琼脂糖纯度高,超微颗粒,非常适合作为电泳实验载体。对比于其他的琼脂糖,琼脂糖水化速度快,使用者无需煮沸过长时间,否则易导致胶液浓稠,不利于混匀,凝胶后易破损。

  3.熔点范围:62-68℃ ,凝胶温度 ( 1.0%):24-29℃

  琼脂糖凝胶制备

  用1×TBE溶液配制1%浓度琼脂糖凝胶

  1.用于制备胶液的锥形瓶体积应为胶液体积的2-4倍,缓慢向缓冲液中加入琼脂糖,边加边搅拌,防止琼脂糖聚集。记录瓶体和溶液总重量。

  2.微波炉高火加热30s,根据配制的溶液体积调整加热时间。加热时间与微波炉、瓶体大小和琼脂糖浓度有关。

  3.摇匀琼脂糖溶液。

  4.再次高火加热30s,摇匀琼脂糖溶液。

  5.将溶液再次放回微波炉,高火加热至沸腾(大约10-35s)。接触移动时琼脂糖胶液可能会剧烈沸腾,小心操作,避免烫伤。从微波炉拿出后,室温冷却1-2min,轻轻摇晃使液体里的气泡溢出。

  6.重新放回微波炉,高火加热,使之沸腾约15s,观察琼脂糖的溶解状态,如果仍有颗粒存在,重复该步骤直至所有晶体全部溶解。

  7.待琼脂糖完全溶解成液体,重新称量总重量,计算蒸发液体量,用水补齐至原始重量,摇匀液体。

  8.建议胶液冷却至50-55℃时灌胶,有利于凝胶孔径均匀一致,不至于损伤制胶仪。灌胶前轻轻摇晃琼脂糖溶液,释放胶液中残存的气泡。

  9.向制胶槽中灌胶,一般胶的厚度3-5mm,灌胶后尽量排除梳孔之间或底部的气泡。

  10.在室温放置(30-45min)使胶充分凝结。

  如果要制备不同浓度和不同体积的凝胶,请注意以下两点:

  1.在凝胶溶液煮沸前至少进行2次摇匀。

  2.胶液沸腾后,每隔10-15s观察一次胶液溶解程度(间隔时间取决于胶液浓度和体积)。

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