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RIPA裂解液

货号:G2002-100ML

品牌:Servicebio

价格:¥120

规格: 100ml

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  产品简介:

  RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞、组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解后的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA裂解液有很多配方,按效果来分主要分为强,中,弱三种。本裂解液为RIPA强裂解液,其主要成分为50mM Tris-Hcl,150mM NaCl,1 mM EDTA-Na2, 1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS。

  包装内容:

产品货号 产品名称 规格
G2002 RIPA裂解液(强) 30mL/100mL

  保存条件:

  4℃避光保存,有效期12个月。

  使用方法:

  对于组织样品:

  1.组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

  2.加入10倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)冰上彻底匀浆。

  3.将匀浆液转移至1.5mL离心管中,振荡。冰浴30 min,期间用移液器反复吹打,确保细胞完全裂解。

  4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白溶液。

  对于培养细胞样品:

  1.对于贴壁细胞:

  (1)用PBS冲洗细胞2-3次。最后一次彻底吸干残留液。

  (2)加入适当体积的本试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-5 min。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。

  (3)用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5mL离心管中。

  2.对于悬浮细胞:离心收集细胞,每6孔板细胞加约250 μL本试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。

  3.冰浴30 min,期间每10 min用200 μL移液器反复吹打数次,确保细胞完全裂解。

  4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白。

  注意事项:

  1.对于组织样品:每50 mg组织约加入1mL的本试剂裂解。对于软骨、皮肤等组织,可适当减少试剂用量,以提高蛋白浓度。

  2.对于培养细胞样品:正常细胞密度下,每个6孔板细胞加入250 μL左右裂解液。其它类推。

  3.裂解时可能会出现粘稠状。可用移液器反复吹打或涡旋仪振荡,直至呈液状为止。如果一直较稠,可再加入适量裂解液。

  4.本试剂不含有蛋白酶抑制剂,有需要可另外加入配合使用。推荐使用本公司的G2006、G2007、G2008等相关蛋白酶抑制剂。

  5.此试剂对人体有害,请适当防护。